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酵素の反応速度論
実験日 7月5日
目的 α_アミラーゼの活性測定を行い、酵素反応の最大速度（Vmax）とミカエリス定数 (Km)を求める。
原理
ミカエリスメンテンの理論 : 酵素の反応速度 (v) と気質濃度 (S) との関係は、まず基質濃度が低いときは、ほぼ直線関係を示し1次反応に従う。次に、これよりも濃度を増やしていくと、増した分だけ速度が得られなくなり、更に増すと、反応速度は最大値に達して基質濃度と無関係に一定となり、0次反応を示すようになる。この0次状態における酵素反応速度を最大速度 (Vmax) と呼び、その半分の速度 (1/2Vmax)を与える基質濃度をミカエリス定数 (Km) という。これは下記の式の関係にある。
このミカエリスメンテンの式を変形すると、次のような式が得られる。
この式は、1/vおよび1/[S]を関数として直角座標上にプロットすると、直線が得られ、その直線とXおよびY座標軸との交点から、VmaxとKmを求めることができる。
実験材料
1%可溶性デンプン 6ml
緩衝液 : 0.1M リン酸緩衝液 pH6.0 10ml
α_アミラーゼ : 2mg/100...
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