連関資料 :: 酵素の反応速度論
資料:6件
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酵素の反応速度論
- 酵素の反応速度論 実験日 7月5日 目的 α_アミラーゼの活性測定を行い、酵素反応の最大速度（Vmax）とミカエリス定数 (Km)を求める。 原理 ミカエリスメンテンの理論 : 酵素の反応速度 (v) と気質濃度 (S) との関係は、まず基質濃度が低いときは、ほぼ直線関係を示し1次反応に従う。次に、これよりも濃度を増やしていくと、増した分だけ速度が得られなくなり、更に増すと、反応速度は最大値に達して基質濃度と無関係に一定となり、0次反応を示すようになる。この0次状態における酵素反応速度を最大速度 (Vmax) と呼び、その半分の速度 (1/2Vmax)を与える基質濃度をミカエリス定数 (Km) という。これは下記の式の関係にある。 このミカエリスメンテンの式を変形すると、次のような式が得られる。 この式は、1/vおよび1/[S]を関数として直角座標上にプロットすると、直線が得られ、その直線とXおよびY座標軸との交点から、VmaxとKmを求めることができる。 実験材料 1%可溶性デンプン 6ml 緩衝液 : 0.1M リン酸緩衝液 pH6.0 10ml α_アミラーゼ : 2mg/100
- レポート 理工学 酵素 反応速度 α_アミラーゼ ミカエリス定数
550 販売中 2006/12/12- 閲覧(9,725)
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酵素反応速度論 評価：A
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酵素の反応速度論- ミカエリス・メンテン
- 「 ミカエリス・メンテンの 式を 実 習を 通して理 解 する」 ことがこの 実 験 の目 的 である。 に お け る 吸 光 度 を 測 定 す る 。 そ の 値 か ら 分 解 さ れ た 基 質 の 量 を 計 算 し 、基 質 の 種 々 酵素(E)としてタンパク質分解酵素であるトリプシン、基質(S)として BAPA (Benzoyl-L-arginie p-nitroanilide)を用いて酵素反応を行い、反応後の 410nm の濃度における酵素反応の初速度(mol/min)を求める。その結果を基に、基質 初濃度と反応初速度のグラフを作成する。さらに、Lineweaber-Burk プロットを作 成し、酵素の反応速度論的考察を行う。
- 生化学 分子生物学 ミカエリス・メンテン Lineweaber-Burk 酵素 反応速度 vmax km 基質濃度 最大速度
- 1,650 販売中 2013/04/09
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加水分解酵素の反応速度論的解析
- キモトリプシンのinitial burstの測定 目的 酵素キモトリプシンは芳香族アミノ酸(フェニルアラニン,トリプトファン,チロシン)残基のC末端側のペプチド結合を特異的に阻害することが知られている.今回の実験では以下のようにp-nitrophenyl acetate (PNPA)がキモトリプシンに攻撃されることで黄色のp-nitrophenolが生成される. この吸光度変化を測定し,キモトリプシンの活性速度が求められる.p-nitrophenolのモル吸光係数を求め,キモトリプシンの定常状態速度とinitial burst量を計測する. 方法 1.KH2PO4(MW=136,4.08g)を上皿天秤で量り取りビーカーに移し,約250mlの純水を加えて攪拌して溶かした.pHメーターでpHを計りながら固体のKOHを少量ずつ加えた.pH7.0に近くなったら1MのKOHを加えてpHを7.0に合わせ,メスシリンダーに移したのち,純水を加えて最終体積を300mlにし,100mMリン酸カリウム緩衝液を調製した. 2. p-nitrophenol(MW=139,0.0139g)をミクロ天秤で計り,少
- キモトリプシン initial burst Lambert beerの法則 ミカエリスメンテン式 吸光度 定常状態速度 阻害剤 β-ガラクトシダーゼ 全活性 比活性 酵素 Beer-Lambert law
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