資料紹介

● 目的
　秋刀魚の加工品から脂質を抽出し、GLC内部標準法によりコレステロールを分析する。
● 実験手順
　遠心管に試料0.5gを秤量し4NKOHを12ml加えホモジナイズし、100ml共栓マイヤーフラスコに移す。
　同じ遠心管にエタノール9mlを入れホモジナイズ後マイヤーフラスコに合わせる。
　冷却管を装置した60℃のウォーターバスに1時間つける。
　カラスフィルターで減圧濾過し、ソクスレー受器にとる。
　エバポレーターで溶媒を留去する。
　クロロホルムを25ml加え、共栓50mlマイヤーフラスコに移す。
　内部標準としてコレスタン(1mg/ml)を0.5ml(成分表より検出コレステロール量を予測し近い値をだす)加える。
　脂質溶液を分液ロート１に移し、マイヤーフラスコにエタノール2-3mlを加え洗浄しロート１にあわし、振とう機に5分かける。
　分液ロート２を下に受けた状態でロート１の気泡が消えたら下層のみを移す。
　メスシリンダーでヘキサンを20ml量りマイヤースラスコに入れ、洗浄液をロート２に合わせ、振とう機に5分かける。蒸留水10mlを入れ蓋をし、手で20回振とうし蒸留水10mlを入れ蓋をし、手で20回振とうし
　ロート２の気泡が消えたら下層を分液ロート３に移し、マイヤーフラスコを洗浄したヘキサン20mlを入れ振とう機に5分かける。上層はロート１に合わせる。
　ロート３の気泡が消えたら下層は捨て、上層のみをロート１に合わせる。
　ロート１に蒸留水10mlを入れ下層(けん化物)を捨てる。この工程は2回行う。
　蒸留水10mlを入れ蓋をし、手で20回振とうし静置した後下層を捨てる。
　再度蒸留水10mlを入れ蓋をし、手で20回振とうし20分静置し下層を捨てる。その際下層の液(石鹸)が中性かをｐH試験紙で確かめる。
　無水硫酸ナトリウムを加え軽く振とうした後、5Aろ紙を用いナス型フラスコへろ過する。ヘキサン10mlで分液ロート１を洗った洗浄液も一緒にろ過する。

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実施日　
コレステロールの分析
目的
秋刀魚の加工品から脂質を抽出し、GLC内部標準法によりコレステロールを分析する。
実験手順
遠心管に試料0.5gを秤量し4NKOHを12ml加えホモジナイズし、100ml共栓マイヤーフラスコに移す。
同じ遠心管にエタノール9mlを入れホモジナイズ後マイヤーフラスコに合わせる。
冷却管を装置した60℃のウォーターバスに1時間つける。
カラスフィルターで減圧濾過し、ソクスレー受器にとる。
エバポレーターで溶媒を留去する。
クロロホルムを25ml加え、共栓50mlマイヤーフラスコに移す。
内部標準としてコレスタン(1mg/ml)を0.5ml(成分表より検出コレステロール量を予測し近い値をだす)加える。
脂質溶液を分液ロート１に移し、マイヤーフラスコにエタノール2-3mlを加え洗浄しロート１にあわし、振とう機に5分かける。
分液ロート２を下に受けた状態でロート１の気泡が消えたら下層のみを移す。
メスシリンダーでヘキサンを20ml量りマイヤースラスコに入れ、洗浄液をロート２に合わせ、振とう機に5分かける。蒸留水10mlを入れ蓋をし、手で20回振とうし蒸留水1...

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