酵素科学実験

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酵素科学実験(タンパク質の精製・酵素学実験)
【実験目的】
 酵素の精製法及び活性の測定方法を身につける。
 酵素活性の単位について理解する。
【実験方法】
実験Ⅰ 酵素活性の測定
 <使用試薬>
   0.5M Tris-HCl Buffer (pH8.5) ,L-カルニチン溶液 (50mM)
   発色剤 ,酵素液 ,NAD溶液(5mM) ,0.5N HCl
 <操作>
   ・・・

実験Ⅱ 反応時間と基質変化量の関係
 <使用試薬>
   0.5M Tris-HCl Buffer (pH8.5) ,L-カルニチン溶液 (50mM)
    発色剤 ,酵素液(A=×3200 B=×800) ,NAD溶液(5mM) ,0.5N HCl
 <操作>
実験Ⅲ イオン交換クロマトグラフィー
 <使用試薬>
   陰イオン交換樹脂(DEAE-トヨパール)
平衡化用Buffer(10mM リン酸カリウムBuffer pH7.5 + 2-メルカプトエタノール)
溶出用Buffer(0.2M KCl , 0.4MKCl)
酵素粗抽出液 , 0.5M Tris-HCl Buffer (pH8.5) ,L-カルニチ

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酵素科学実験(タンパク質の精製・酵素学実験)
【実験目的】
 酵素の精製法及び活性の測定方法を身につける。
 酵素活性の単位について理解する。
【実験方法】
実験Ⅰ 酵素活性の測定
 <使用試薬>
   0.5M Tris-HCl Buffer (pH8.5) ,L-カルニチン溶液 (50mM)
   発色剤 ,酵素液 ,NAD溶液(5mM) ,0.5N HCl
 <操作>
実験Ⅱ 反応時間と基質変化量の関係
 <使用試薬>
   0.5M Tris-HCl Buffer (pH8.5) ,L-カルニチン溶液 (50mM)
    発色剤 ,酵素液(A=×3200 B=×800) ,NAD溶液(5mM) ,0.5N HCl
 <操作>
実験Ⅲ イオン交換クロマトグラフィー
 <使用試薬>
   陰イオン交換樹脂(DEAE-トヨパール)
平衡化用Buffer(10mM リン酸カリウムBuffer pH7.5 + 2-メルカプトエタノール)
溶出用Buffer(0.2M KCl , 0.4MKCl)
酵素粗抽出液 , 0.5M Tris-HCl Buffer (pH8.5) ,L-カルニチ...

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