PCRの手順
まず下記の物質から反応液を調整する。
鋳型DNA
PCR buffer
MgCl2
オートクレーブ水
dNTP
upper PCR primer
lower PCR primer
Taq DNA plymerace
次に以下のステップを繰り返す
DNAを熱変性させ、一本鎖にする。(92~97℃)
一本鎖DNAにprimerをアニーリングする。(Tm値より5℃低い温度)
4種類のdNTPの共存下で、Taq polymeraceにより鋳型から相補的塩基配列を読み取り、二本鎖DNAを複製する。(72℃前後)
このサイクルを20回ほど繰り返すと220≒106倍になる。
Primerのデザ
PCRの手順
まず下記の物質から反応液を調整する。
鋳型DNA
PCR buffer
MgCl2
オートクレーブ水
dNTP
upper PCR primer
lower PCR primer
Taq DNA plymerace
次に以下のステップを繰り返す
DNAを熱変性させ、一本鎖にする。(92~97℃)
一本鎖DNAにprimerをアニーリングする。(Tm値より5℃低い温度)
4種類のdNTPの共存下で、Taq polymeraceにより鋳型から相補的塩基配列を読み取り、二本鎖DNAを複製する。(72℃前後)
このサイクルを20回ほど繰り返すと220≒106倍になる。
Primerのデザ...